El archivo CSS debe ser guardado dentro de la carpeta Static y referenciado de la siguiente forma en el archivo layout.tpl:
{{ 'css/style.css' | static_url | css_tag }}
El CSS también puede ser un archivo .sass o .tpl. Si la hoja de estilos es un archivo .sass o .tpl y hace referencia a una imagen, no se pueden usar paths relativos por una limitación del sistema. Se debe acceder a la imagen mediante el filtro static_url:
.selector { background-image: url("{{ 'img/background.jpg' | static_url }}"); }